第一部分 · 全景与硬件结构
液相色谱柱使用全景
一根色谱柱从到货到判废，会经过收货验收、安装连接、日常运行、停机保存四个常规阶段，以及漏液与性能异常两类非常规状态。使用中的多数问题并非出自填料本身，而是出自柱外的连接环节 —— 接头制式不匹配、探入深度不对、管路口径选错、卡套重复使用。本页把这些环节按时序展开，并对接口与管路部分给出剖面与爆炸示意。
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读法：纵向看，问题按责任环节归属；横向看，同一根柱子在不同阶段的关注点并不相同。收货阶段的确认成本较低，运行阶段的排查成本较高 —— 接口制式与流向箭头若在收货时确认，可避免后续多数连接类返工。
柱外因素占比较高峰形与保留异常中，相当一部分来自连接管路与接头，而非填料失效。排查时宜先做柱外确认。
卡套具有不可逆性不锈钢卡套一经压紧即与管材形变咬合，换到探入深度不同的接口上通常无法再次密封。
口径称谓易混淆1/16″ 与 1/8″ 指管材外径，与内径无关。内径决定柱外体积，外径决定接头选配。
材质各有适用边界PEEK 便于免工具操作但耐压与耐溶剂有限；不锈钢耐压高但对卤素与强酸敏感。
1 · 柱体与柱头解剖
分析型液相色谱柱由柱管、两端端接头（end fitting）、筛板（frit）、密封件与填料床构成。理解各部件的位置关系，是判断漏液点位与死体积来源的前提。
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要点：柱管两端并不对称。装填时物料自入口端压入，靠近出口端的床层密实度相对较低。柱身箭头标示的是装填时的压实方向，按箭头通液可维持床层受压状态；反向通液则使床层受到松动方向的作用力。
1.1 各部件的功能与失效表现
| 部件 | 功能 | 常见失效 | 外部可观察的表现 |
|---|
| 柱管 | 承压容器，约束填料床 | 内壁腐蚀、卤素点蚀 | 基线金属离子干扰、峰拖尾加剧 |
| 入口筛板 | 阻挡颗粒物，分配液流 | 堵塞、局部结垢 | 柱压逐步升高，柱效变化滞后 |
| 出口筛板 | 保持填料不流失 | 破损、填料穿漏 | 检测器噪声上升、系统后段堵塞 |
| 端接头 | 提供密封面与流道过渡 | 密封面划伤、螺纹损伤 | 接口渗液、拧紧后仍漏 |
| 填料床 | 提供保留与选择性 | 床层塌陷、空隙、化学降解 | 峰分裂、双峰、保留时间前移 |
1.2 柱头端接头爆炸关系
端接头处的部件顺序，决定了连接是否密封、是否留有死体积。以下为常见的压紧式（compression）接口的爆炸关系。
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要点：压紧式接口的密封由卡套与锥面共同完成，而管端定位由管材顶到接头底部实现。若在拧紧前未将管材推到底，卡套会在错误位置咬合，之后即便反复拧紧也难以消除该间隙。
卡套一经压紧即与管材产生塑性形变。将同一根带卡套的管材转接到探入深度不同的接口时，通常需要更换新卡套并重新切管，而非直接沿用。
2 · HPLC 柱与 UPLC 柱的差异
两者的分离机理相同，差异集中在粒径、承压等级与对柱外体积的敏感度。把 UPLC 柱装到 HPLC 系统上，往往因系统柱外展宽过大而无法体现其柱效优势。
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要点：UPLC 柱的柱体积约为常规 HPLC 柱的十分之一量级。系统连接管路内径与长度若沿用 HPLC 配置，柱外展宽会占用较大比例的峰宽预算，实测柱效低于柱本身的能力。
| 维度 | HPLC 柱 | UPLC / UHPLC 柱 | 操作影响 |
|---|
| 填料粒径 | 3–5 µm | 1.5–2.0 µm | 粒径减半，柱压约升至四倍 |
| 常用内径 | 3.0 / 4.6 mm | 1.0 / 2.1 mm | 内径决定线速度与上样体积上限 |
| 承压等级 | 一般 40 MPa 以内 | 可达 100 MPa 以上 | 接头与管路需匹配同等承压 |
| 入口筛板孔径 | 约 2 µm | 约 0.2–0.5 µm | 孔径越小，对颗粒物越敏感 |
| 连接管内径 | 0.17 mm（0.007″）常见 | 0.10 mm（0.004″）或更细 | 沿用粗管会造成明显展宽 |
| 样品前处理 | 0.45 µm 滤膜 | 0.22 µm 滤膜 | 过滤等级不足会加速筛板堵塞 |
上表粒径与压力的对应关系依据 Darcy 定律的常规推论（柱压与粒径平方成反比）；具体数值随柱长、流速与流动相黏度变化。
3 · 保护柱系统
保护柱以低成本的可更换单元承接颗粒物与强吸附组分，延缓分析柱入口筛板与床层前端的劣化。三种常见形式在死体积与更换成本上各有取舍。
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选用倾向：基质相对干净、以柱效为先的分析，选 A；日常大批量样品、更换频繁，选 B；方法尚在调整、需灵活拆装，选 C。三者都会引入柱外体积，UPLC 条件下宜优先考虑 A 或低死体积型 B。
更换判据以柱压增幅为主要指标。相对初始值上升约 20% 时安排更换，可在柱效下降前介入。
相化学匹配保护柱应与分析柱同为 C18 或同类键合相，避免在柱前引入不同的保留行为。
不宜替代前处理保护柱承接的是残余颗粒物。样品过滤与离心仍需在进样前完成。
记录更换时点保护柱更换会使保留时间产生小幅位移，记录时点有助于区分方法漂移与硬件变化。
第二部分 · 接口、螺纹与管路
1/16″ 与 1/8″ 的确切含义
液相系统中常说的「1/16 管」「1/8 管」指的是管材外径，用于确定接头与卡套的选配；管材内径另行标注，决定管内体积与柱外展宽。两个参数彼此独立，同一外径下有多种内径可选。混淆两者是订购与连接环节中较常见的偏差来源。
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要点：外径决定「装得上」，内径决定「跑得好」。订购时两者需同时给出，例如「1/16″ 外径 × 0.17 mm 内径 PEEK 管」。仅说「1/16 管」不足以确定所需规格。
4.1 管内体积的量级
柱前与柱后管路的体积直接叠加到峰宽预算上。以下为常见内径下每 10 cm 管长的体积，可用于估算连接方案的体积代价。
| 内径 | 英制 | 每 10 cm 体积 | 典型用途 | 说明 |
|---|
| 0.064 mm | 0.0025″ | 约 0.3 µL | UHPLC 柱前 | 易堵，需 0.22 µm 过滤 |
| 0.10 mm | 0.004″ | 约 0.8 µL | UPLC 柱前 | 2.1 mm 内径柱的常用配置 |
| 0.13 mm | 0.005″ | 约 1.3 µL | UPLC / 窄径 HPLC | 兼顾压降与展宽 |
| 0.17 mm | 0.007″ | 约 2.3 µL | 常规 HPLC 柱前 | 4.6 mm 内径柱的常用配置 |
| 0.25 mm | 0.010″ | 约 4.9 µL | 柱后至检测器 | 低压段，展宽影响需评估 |
| 0.50 mm | 0.020″ | 约 19.6 µL | 废液、泵到进样阀 | 不用于柱前后关键流路 |
| 1.6 mm | 1/16″ 内径 | 约 201 µL | 制备液相、溶剂输送 | 常配 1/8″ 外径管材 |
体积按圆管几何式 V = π(d/2)²L 计算，取标称内径，未计入接头内部流道体积。实测值受管材公差影响。
估算方法：把柱前柱后管路体积之和控制在柱体积的适当比例以内可减少展宽影响。以 2.1 × 50 mm 柱（柱体积约 173 µL，孔隙率按 0.65 计）为例，若柱前用 0.17 mm 内径管 30 cm，仅此一段即约 6.8 µL；换为 0.10 mm 内径可降至约 2.4 µL。
5 · 螺纹制式与接头几何
液相接头的螺纹制式并非全球统一。同为 1/16″ 管路，柱端、进样阀端与检测器端可能采用不同螺纹与不同锥面深度。选错制式时，螺纹或者拧不进，或者能拧进但密封面不贴合而渗液。
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处置建议：为每台仪器建立接口清单，记录进样阀出口、柱前、柱后、检测器入口各自的螺纹制式与锥面深度。更换柱品牌时先核对清单，再决定是否需要转接件。
5.1 卡套的压紧机理
卡套（ferrule）在拧紧过程中受锥面挤压产生径向收缩，咬入管壁形成密封带。该形变为塑性形变，卸下后不会回弹。
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操作顺序：先将管材推到接头底部并保持轴向压力，再旋入螺母至手紧，最后按规定圈数或力矩拧紧。若顺序颠倒，卡套会在管材未到底的位置咬合，形成图中上半部分的空腔。
| 卡套材质 | 可重复使用 | 耐压参考 | 适用 | 注意 |
|---|
| 不锈钢 | 否（位置已固定） | 高 | 高压柱前、UHPLC | 换接口通常需换新卡套并重切管 |
| PEEK 一体式 | 有限次 | 中（约 34 MPa 以内） | 常规 HPLC、生物样品 | 反复拆装后密封力下降 |
| PEEK 两件式 | 可 | 中 | 需频繁拆装的场合 | 装配方向不可颠倒 |
| 指拧型免工具 | 可 | 中低 | 方法开发、临时连接 | 过力矩会压溃螺纹 |
耐压参考值为常见产品的标称区间，具体以所用产品的技术资料为准。
6 · 探入深度差异与死体积
不同品牌的接头，其密封锥面到流道底部的距离（探入深度，stub length）并不一致。同一根已压好卡套的管材换到另一制式的接口上，会出现管端顶不到底或顶得过深两种情形。
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判别方法：拆下连接后观察管端。若管端露出卡套前端的长度与接头标称探入深度不符，即为状态 B 或 C。跨品牌连接前建议使用通用型可调节接头，或按目标接口重新切管并压装新卡套。
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排查次序：出现拖尾时，先在不接柱的情况下用零死体积接头短接柱位并进样，观察系统本身的峰形。若短接后峰形正常而接柱后拖尾，问题定位在柱或柱两端接口；若短接后仍拖尾，问题在系统流路。
7 · PEEK 与不锈钢管路的选用差别
两类管材在耐压、耐溶剂、生物兼容性与操作便利性上各有边界，通常按流路段位与样品性质分别选用，而非全系统统一。
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常见配置：柱前高压段用不锈钢或加强型 PEEK（PEEKsil、内衬熔融石英）；柱后至检测器可用 PEEK；生物样品与磷酸化合物分析倾向全流路 PEEK 或惰性表面处理管路；含卤素流动相时避免长期停留在不锈钢管内。
PEEK 在四氢呋喃、二氯甲烷、二甲亚砜中会发生溶胀，表现为内径变化与接头处渗液；在浓硝酸、浓硫酸中会降解。使用上述溶剂的方法宜选用不锈钢或加强型管材。
7.1 管材切割端面的影响
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要点：端面质量问题在低压下常不表现，升压或梯度过程中才出现间歇性渗液，容易被误判为接头或柱的问题。更换接头前先检查端面，可减少无效排查。
第三部分 · 收货、安装、运行与保存
8 · 收货与验收
收货环节的确认成本较低，遗漏的代价则在后续环节放大。新柱到货后，在拆封前后各有一组需要确认的项目。接口制式与流向箭头若在此时核对，可避免安装阶段的返工。
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要点：端塞脱落是运输环节较常见的问题。端塞缺失时储存液会挥发，床层局部干涸后再通液可能形成空隙。到货即发现端塞脱落或柱管有明显液体渗出痕迹的，宜在上机前联系供应方确认处置方式。
| 检查项 | 合格状态 | 异常表现 | 处置 |
|---|
| 外包装 | 无挤压、无液渍 | 包装变形、内衬潮湿 | 拍照留存，联系供应方 |
| 端塞 | 两端均在位且拧紧 | 脱落、松动 | 上机前告知供应方，勿直接通液 |
| 柱管外观 | 无凹陷、无划痕 | 柱管变形 | 不上机，走退换流程 |
| 标签信息 | 与订单一致 | 相型、粒径、尺寸不符 | 核对订单，暂缓使用 |
| 接口制式 | 与现有系统一致 | 螺纹或探入深度不同 | 准备对应接头或转接件 |
| QC 报告 | 批号与柱身一致 | 批号不符、缺页 | 索取对应批次报告 |
| 首次复测 | N 与 As 接近报告值 | 偏差明显 | 先排查系统柱外因素，再判定柱 |
首次复测的偏差不宜直接归因于柱。测试条件、系统柱外体积、检测器时间常数与数据采集频率都会影响实测塔板数。建议以同一系统上一支已知良好的柱作为参照。
9 · 安装与连接
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试漏方法：连接完成后以 0.2 mL/min 起始通液，用无尘纸沿接口一周轻拭，观察是否留有湿痕。逐步升至工作流速，在压力升高过程中重复检查。低流速不漏而高流速漏，通常指向端面质量或卡套压紧不足。
10 · 日常使用的边界条件
柱的寿命主要由化学条件与颗粒物负荷决定。以下四组边界在多数键合硅胶柱上适用，具体数值以所用产品的技术资料为准。
| 边界 | 常规键合硅胶 | 耐碱型键合相 | 聚合物基质 | 越界后的表现 |
|---|
| pH 范围 | 2.0–8.0 | 1.5–12.0 | 1–14 | 低 pH 键合相水解、高 pH 硅胶骨架溶解 |
| 柱温上限 | 约 60 °C | 约 80 °C | 约 80 °C | 高温加速水解，寿命明显缩短 |
| 压力上限 | 按柱标称 | 按柱标称 | 常低于硅胶柱 | 床层压实或筛板变形 |
| 纯水条件 | 高水相下 C18 链可能塌陷 | 同左 | 不受影响 | 保留时间骤降，需再平衡恢复 |
pH 与温度的组合作用强于单一因素。在 pH 上限附近同时使用较高柱温时，寿命下降幅度大于两者单独作用之和（本页推断，未检索到统一的定量模型）。
10.1 缓冲盐的使用与切换
- 配制后过 0.45 µm（UPLC 用 0.22 µm）滤膜，避免不溶物进入系统。
- 盐浓度与有机相比例需同时考虑溶解度。乙腈比例升高时磷酸盐溶解度下降，易在混合点析出。
- 由含盐流动相切换到高比例有机相前，先以 5%–10% 有机相的水溶液冲洗约 10 min，再逐步提高有机相比例。
- 停机保存前排尽缓冲盐，避免结晶堵塞筛板或腐蚀不锈钢流路。
10.2 样品前处理
过滤等级HPLC 用 0.45 µm，UPLC 用 0.22 µm。滤膜材质需与样品溶剂兼容。
溶剂强度匹配进样溶剂强度高于流动相起始条件时，前端峰会展宽或分裂。宜以起始流动相溶样。
基质去除血清、发酵液等基质建议先做固相萃取或蛋白沉淀，仅靠保护柱不足以承接。
进样体积体积过大会造成柱头超载与峰展宽。窄径柱的可接受进样体积按内径平方比例缩减。
11 · 保存与养护
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时长参考：数日内的短期停机，保持在末次运行的有机相条件下封堵即可；超过一周的停机，按上图置换为对应保存液。长期存放期间无需定期通液。
| 相型 | 短期（数日） | 长期（一周以上） | 禁忌 |
|---|
| C18 / C8 / 苯基 | 末次流动相（已排盐） | 纯乙腈或纯甲醇 | 纯水长期存放 |
| C18 亲水型 / 极性嵌入 | 末次流动相 | 乙腈 / 水 (65:35) 或按说明 | 强碱性溶液 |
| HILIC | 末次流动相 | 90% 乙腈 / 水 | 高比例水相 |
| 硅胶正相 | 正己烷 / 异丙醇 | 正己烷 | 含水溶剂 |
| 离子交换 | 末次缓冲液 | 含防腐剂稀盐溶液 | 无防腐剂的水溶液 |
| SEC / GPC | 末次流动相 | 按填料指定 | 更换溶剂体系不做过渡 |
11.1 再生与反冲
柱压升高且更换保护柱后未恢复时，可尝试再生。反冲（反向通液）能推出入口筛板截留的颗粒物，但会使床层受到松动方向的作用力。
- 反冲前断开柱与检测器的连接，将出液导入废液，避免颗粒物进入检测池。
- 反冲流速取正常流速的一半以下，时间控制在 10 min 量级。
- 反冲后按正向重新平衡，并复测塔板数与不对称因子，确认床层未受影响。
- 部分供应商的柱不建议反冲。执行前查阅所用产品的技术资料。
强溶剂冲洗次序（反相柱）：水 → 甲醇 → 异丙醇 → 二氯甲烷 → 异丙醇 → 甲醇 → 水，每步 10–20 倍柱体积。含二氯甲烷的步骤需确认管路材质兼容（PEEK 管不适用）。
第四部分 · 漏液、故障排查与速查
12 · 漏液专题
漏液是液相系统中反馈较直接、成因却较分散的一类问题。同样是接口处见湿，可能来自卡套压紧不足、端面斜切、探入深度不符、密封面划伤，也可能来自上游部件而沿管路流至此处。按点位逐一排除，比反复拧紧更有效。
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次序建议：先擦干并记录初始状态，再以工作流速运行 5–10 min，逐点复查。若 5 号点位见湿而 4 号干燥，问题落在分析柱入口连接；若 4、5 均见湿，优先怀疑上游沿管路流下。
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要点：纯有机流动相渗漏挥发快，可能不留明显痕迹，仅表现为压力偏低或基线不稳。此类情形需借助升压试验与流量校核判断。
| 现象 | 可能成因 | 处置次序 |
|---|
| 手紧即漏，加力后止漏 | 拧紧不足 | 按规定圈数拧紧；若需明显超出常规力度才止漏，检查端面 |
| 拧到底仍持续渗液 | 制式不符 / 探入深度不符 / 密封面划伤 | 卸下核对螺纹与探入深度；检查接头锥面 |
| 低流速不漏，升压后漏 | 端面斜切 / 卡套压紧不足 | 重切管去毛刺，换新卡套重装 |
| 间歇性渗液 | 端面不平 / 温度波动致材料形变 | 检查端面；PEEK 件在柱温箱内注意热形变 |
| 反复拧紧后螺纹打滑 | 过力矩损伤 | 更换接头与卡套，不再复用 |
| 接口干燥但压力偏低 | 上游渗漏 / 泵密封失效 | 断开柱做流量校核，逐段定位 |
13 · 压力与峰形异常排查
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基准值的建立：新柱首次平衡后，在标准条件（固定流速、柱温、流动相组成）下记录柱压，作为该柱的基准。此后的判断以相对基准的变化幅度为准，而非压力读数本身 —— 不同系统的管路配置会带来数 MPa 的差异。
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使用方式：先看不保留组分（死时间标记）的峰形。该峰不经历保留过程，其展宽与拖尾主要来自柱外体积与流路几何，可用于分离柱内与柱外因素。
14 · 一页速查
14.1 接口与管路
| 项目 | 要点 |
|---|
| 1/16″ 含义 | 管材外径 1.59 mm，与内径无关；订购需同时给出内径 |
| 1/8″ 含义 | 管材外径 3.18 mm，多用于制备、泵入口与废液 |
| 柱前内径选择 | 4.6 mm 柱配 0.17 mm；2.1 mm 柱配 0.10 mm 或更细 |
| 常见螺纹 | 10-32 UNF（分析主流）、1/4-28 UNF（低压/制备）、6-40（微型）、M6×1（部分欧系） |
| 易混制式 | 10-32 UNF 与 M5×0.8；1/4-28 UNF 与 M6×1 |
| 卡套复用 | 不锈钢卡套压紧后位置固定，换异制式接口需换新卡套并重切管 |
| 装配顺序 | 管材顶到底 → 保持轴向压力 → 手紧 → 按规定圈数拧紧 |
| PEEK 禁用溶剂 | 四氢呋喃、二氯甲烷、二甲亚砜、浓硝酸、浓硫酸 |
| 不锈钢注意 | 卤素离子与强酸易致点蚀；螯合性分析物可能与金属表面作用 |
14.2 异常与首查项
| 现象 | 首查 | 次查 | 末查 |
|---|
| 柱压升高 | 更换保护柱柱芯 | 断开柱测系统压力 | 强溶剂冲洗 / 反冲 |
| 柱压降低 | 各接口渗漏 | 泵气泡与单向阀 | 床层塌陷（伴峰分裂） |
| 柱压波动 | 是否与泵冲程同频 | 流动相脱气 | 柱温稳定性 |
| 峰拖尾 | 柱前接口探入深度 | 柱头污染 | 流动相 pH 与硅醇作用 |
| 峰前伸 | 进样溶剂强度 | 进样量 | 柱头超载 |
| 峰分裂 | 是否各峰均分裂 | 入口筛板局部堵塞 | 床层空隙 |
| 整体展宽 | 死时间峰的峰形 | 连接管内径与长度 | 柱效衰减 |
| 保留时间漂移 | 柱温稳定性 | 流动相配制一致性 | 平衡是否充分 |
| 接口渗液 | 螺纹制式与探入深度 | 管材端面质量 | 密封面损伤 |
| 基线噪声上升 | 流通池是否有气泡 | 流动相杂质 | 出口筛板破损致填料流失 |
14.3 保存液
| 相型 | 长期保存液 | 禁忌 |
|---|
| C18 / C8 / 苯基 | 纯乙腈或纯甲醇 | 纯水长期存放 |
| HILIC | 90% 乙腈 / 水 | 高比例水相 |
| 硅胶正相 | 正己烷 | 含水溶剂 |
| 离子交换 | 含防腐剂的稀盐溶液 | 无防腐剂的水溶液 |
| SEC / GPC | 按填料指定储存液 | 不做过渡直接换溶剂体系 |
14.4 问题归属矩阵
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读法：安装连接列的红格数量较多，与图 1 的判断一致 —— 连接环节是通用问题的集中区。收货列多为确认动作，成本低而收益高。
15 · 高频问答
以下问答整合自技术支持的常见咨询，按选型、使用、寿命、流动相四类归置。更简短的速查版本见常见问题 FAQ。
选型
C18A 为通用型，保留与负载较高，适用于多数反相应用；C18C 的 pH 适用范围较宽（约 1.5–12），适合条件较苛刻的流动相或小肽分离；C18D 面向亲水性化合物，在高水相条件下保留较稳定，可直接用于 LC-MS 而无需离子对试剂。选型时先确定样品极性与流动相 pH，再定型号。
以下情况建议配置：① 样品基质复杂（血清、尿液、食品提取物）；② 每日进样超过 20 针；③ 样品可能含颗粒物。保护柱可延缓分析柱入口筛板与床层前端的劣化，柱芯更换成本远低于更换分析柱。具体延寿倍数随基质与前处理水平变化。
基础填料相同，粒径不同。分析柱常用 3 µm 或 5 µm，制备柱常用 10 µm 或 20 µm。粒径较大时背压较低，适合大流量制备；粒径较小时柱效较高，适合精细分析。选型按目标取舍 —— 以分辨率为先或以处理量为先。
在压力允许的前提下可以安装，但实测柱效通常低于该柱的标称能力。UPLC 柱柱体积约为常规 HPLC 柱的十分之一量级，HPLC 系统的连接管内径、检测池体积与数据采集频率会带来相对较大的柱外展宽。若需发挥其柱效，宜同步更换细内径连接管并提高采集频率。详见
第 2 节。
使用与操作
建议以 10–20 倍柱体积的流动相平衡后再进样。若柱以甲醇储存，切换到水相时宜先经 50% 甲醇/水 过渡至纯水，避免直接以高水相冲洗导致 C18 链塌陷（亲水型 C18 与极性嵌入相可直接用纯水）。
有。柱身箭头标示装填时的压实方向，应按箭头方向通液。反向通液会使床层受到松动方向的作用力，可能形成空隙并造成柱效下降与峰形变宽，且通常不可恢复。安装前确认箭头朝向检测器一侧。
不宜以继续加力应对。按此次序检查：① 螺纹制式是否匹配（旋入前两牙手感发涩即停）；② 管材是否顶到接头底部；③ 卡套是否为其它制式接口压装过；④ 管材端面是否垂直、有无毛刺；⑤ 接头密封锥面是否有划伤。多数持续渗液源自 ② 与 ③。详见
第 6 节。
需要。磷酸盐、醋酸铵等若留在柱与管路中，可能结晶堵塞筛板或造成不锈钢部件腐蚀。次序为：① 以 5%–10% 有机相的水溶液冲洗约 10 min；② 提高有机相比例至 50%；③ 以纯甲醇或乙腈置换保存。
性能与寿命
常规使用条件下，分析柱可承受约 2,000–5,000 针进样（本页推断，随基质与条件差异较大）。影响较大的因素依次为：样品前处理是否充分、流动相 pH 与柱温是否在适用范围内、是否配置保护柱、每次运行后是否正确冲洗。以柱压相对基准的升幅与塔板数变化作为跟踪指标，比按针数判断更可靠。
常见成因：① 柱头累积颗粒物；② 缓冲盐结晶；③ 蛋白或脂质在柱头沉积；④ 流动相中有气泡。处置次序：先更换保护柱柱芯；断开柱确认系统本身压力是否正常；以强溶剂正向冲洗；仍未恢复时考虑反冲或更换入口筛板。决策路径见
第 13 节。
按此次序核查：① 柱温是否稳定（温度每变化 1 °C，保留时间变化约 1%–2%）；② 流动相配制是否一致（有机相比例、pH、配制方式）；③ 柱是否充分平衡（至少 10 倍柱体积）；④ 流速是否准确（泵校准）；⑤ 柱压是否处于基准范围。
先观察不保留组分的峰形。该峰不经历保留过程，其展宽与拖尾主要来自柱外体积与流路几何。若该峰同样异常，问题多在柱外；若仅保留组分异常且与化合物性质相关，问题多在柱内。也可用零死体积接头短接柱位后进样，对比系统本身的峰形。
流动相与管路
① 不使用磷酸盐、硼酸盐等非挥发性缓冲盐；② 可选甲酸（0.1%）、乙酸（0.1%）、甲酸铵、醋酸铵；③ 有机相多用乙腈（离子化效率较好）或甲醇；④ 选用无需离子对试剂的柱（亲水型 C18、HILIC）；⑤ 流速常取 0.2–0.4 mL/min 以减少离子抑制。
不建议。磷酸盐用于 UV 检测的背景较低，但与 MS 不兼容；醋酸铵兼容 MS 但 UV 背景略高。若同一方法需兼容 UV 与 MS，可选醋酸铵或甲酸铵，配合无需离子对试剂的柱。不同批次流动相不宜混合使用，以免因比例差异造成保留时间漂移。
按流路段位与样品性质分别选用。柱前高压段用不锈钢或加强型 PEEK；柱后至检测器可用 PEEK；生物样品与磷酸化合物分析倾向全流路 PEEK 或惰性表面处理管路。PEEK 在四氢呋喃、二氯甲烷、二甲亚砜中会溶胀，在浓硝酸、浓硫酸中会降解；不锈钢在含卤素或强酸条件下存在点蚀风险。对照见
第 7 节。
两者指管材外径，分别为 1.59 mm 与 3.18 mm，用于确定接头与卡套的选配。内径另行标注，决定管内体积与柱外展宽。分析型液相的柱前后连接多用 1/16″ 外径管，内径按柱内径选取；1/8″ 外径管多用于制备液相、泵入口与废液段。订购时需同时给出外径与内径。详见
第 4 节。
以上未覆盖的情形，可将柱型号、批号、系统配置、流动相组成与故障现象一并发送至技术团队，或通过
在线询价页提交。