多肽原料药的分离与制备纯化

反相色谱是多肽制备纯化的主线模式。以 TFA 或乙酸铵／磷酸盐为流动相体系，C18 填料在 100–120 Å 孔径下对多数 10–40 残基多肽有较好的选择性。载量与分离度需按粗品纯度逐批标定，通常不宜直接沿用他批参数。

缺失肽、非对映异构体、乙酰化与三氟乙酰化副产物与主峰性质接近，单一反相方法一般难以全部分辨。离子交换按净电荷分离、HILIC 按亲水性分离，可与反相构成正交确认，用于放行纯度的相互印证。

脂肽及 GLP-1 类长链多肽疏水性较高，在常规 100 Å 填料上易出现峰形展宽与回收率下降。一般改用 120–300 Å 宽孔基质配合 C8 或 C4 键合相，并适当提高柱温与有机相比例，以改善传质与回收。

PEPONE-24 多功能多肽酸解仪可在控温密闭条件下完成水解前处理，配合柱前衍生化用于氨基酸组成分析。DL 氨基酸试剂盒可作为对照品，用于水解产物中 D／L 构型比例的标定。

从半制备到工业规模，柱床均一性对分离度的影响大于填料本身。麦可旺志提供装柱机、自装制备柱与动态轴向压缩（DAC）装填支持，并可协助完成 Ø200–600 mm 柱径下的放大验证与柱效评价。