第一部分 · 索引与读法
应用案例索引
本页按行业与化合物类别整理代表性分离案例。每条给出分离对象、所用柱型、流动相体系与可迁移的结论。案例条件来自麦可旺志技术团队的方法开发记录与公开应用资料，用于说明选型思路，直接沿用前需按自身样品与仪器条件重新确认。
| 行业 | 覆盖的化合物类别 | 案例数 | 常用模式 |
|---|---|---|---|
| 制药与生物制药 | 多肽、抗生素杂质、原料药 | 2 | 反相（制备与分析） |
| 生物大分子 | 单克隆抗体聚集体 | 1 | SEC |
| 食品检测 | 糖类、农药残留 | 2 | 配位体交换、反相 |
| 生命科学与 LC-MS | 代谢物、氨基酸对映体 | 2 | HILIC + 反相、柱前衍生化 |
案例中的定量结论（纯度、收率、RSD、检出限）为对应条件下的实测或文献值，随样品基质、仪器与操作差异而变化。
第二部分 · 制药与生物制药
2 · 制药与生物制药
2.1 GLP-1 类多肽原料药制备级纯化
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 分离对象 | 司美格鲁肽粗品及其合成杂质 |
| 色谱柱 | HPLCONE 5C18A 制备柱，20 × 250 mm |
| 流动相 | 0.1% TFA 水溶液 / 乙腈，线性梯度 |
| 结果 | 粗品纯化至 99% 以上，单批收率 85% 以上 |
| 可迁移结论 | 脂化修饰多肽的疏水性较强，宜取较高的起始有机相比例并降低梯度斜率，以拉开主峰与近似疏水性杂质的距离 |
延伸：脂化多肽、二硫键肽、大环肽等七类结构的纯化路径与柱型对应，见多肽原料药纯化方案。
2.2 强碱性条件下头孢类抗生素杂质检测
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 分离对象 | 头孢噻肟及 5 种降解杂质 |
| 色谱柱 | HPLCONE 5C18C（耐碱型） |
| 流动相 | 氨水体系 pH 11 / 乙腈 |
| 结果 | 5 种杂质同时检出；经 NaOH 再生后柱效恢复至 98% 以上 |
| 可迁移结论 | 碱性条件可抑制部分化合物的解离并改善峰形，但对柱的 pH 耐受提出要求。常规键合硅胶柱在 pH 8 以上使用会显著缩短寿命，此类方法需选用耐碱型键合相 |
高 pH 方法开发前，先确认所用柱的 pH 上限与允许的柱温组合。pH 与柱温同时接近上限时寿命下降更快，边界见使用与维护。
3 · 生物大分子
3.1 单克隆抗体聚集体分析（SEC-HPLC）
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 分离对象 | 单抗单体、二聚体与多聚体 |
| 色谱柱 | Shodex KW-803 凝胶色谱柱 |
| 流动相 | PBS，pH 6.8，等度 |
| 结果 | 30 min 内完成分离定量，方法精密度 RSD 低于 1.5% |
| 可迁移结论 | SEC 的分离窗口由孔径分布决定，柱长决定分辨率。聚集体定量对进样量敏感，超载会使二聚体峰并入主峰肩部 |
延伸：七类生物大分子模态的工序框架与介质选型，见生物大分子分析方案。
第三部分 · 食品与生命科学
4 · 食品检测
4.1 蜂蜜中 6 种糖类同时测定
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 分离对象 | 葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、松三糖、棉子糖 |
| 色谱柱 | SUGAR-Ca 专用柱，8 × 300 mm |
| 流动相 | 纯水，等度，柱温 75 °C |
| 检测 | 示差折光（RI） |
| 结果 | 30 min 内完成 6 种糖定量，可用于区分天然蜂蜜与掺糖蜂蜜 |
| 可迁移结论 | 配位体交换模式以纯水为流动相，柱温是主要的选择性变量。柱温波动会直接改变糖类的出峰次序间距，需使用柱温箱并加严控温 |
4.2 蔬菜中 25 种有机磷农药残留
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 分离对象 | 25 种有机磷农药 |
| 前处理 | QuEChERS 提取 + SPE C18 小柱净化 |
| 色谱柱 | HPLCONE 5C18A，4.6 × 150 mm |
| 检测 | 二极管阵列（DAD） |
| 结果 | 25 min 内完成检测，定量限均低于 0.01 mg/kg |
| 可迁移结论 | 复杂基质的多组分方法，分离度余量主要靠前处理换取。净化不充分时，基质峰会占用峰容量并加速柱头劣化 |
5 · 生命科学与 LC-MS
5.1 血清代谢组学双平台分析
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 分离对象 | 血清中极性与中等极性代谢物 |
| 平台一 | HILIC 柱 —— 氨基酸、核苷酸、有机酸 |
| 平台二 | HPLCONE 5C18D（亲水型）—— 脂肪酸、磷脂 |
| 检测 | ESI-MS，两平台均无需离子对试剂 |
| 结果 | 两平台互补，检测代谢物总数 800 种以上 |
| 可迁移结论 | 单一模式难以覆盖跨极性范围的代谢物。以两条正交流路分别覆盖，比在一条方法内折中更易达到覆盖度要求。选用无需离子对试剂的柱可避免离子源污染 |
5.2 蛋白水解物中 D-氨基酸含量测定
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 分离对象 | 20 种氨基酸的 D / L 对映体 |
| 衍生化 | OPA / FMOC 柱前衍生化 |
| 色谱柱 | HPLCONE 5C18D，4.6 × 150 mm |
| 检测 | 荧光检测 |
| 结果 | 45 min 内完成分离，方法精密度 RSD 低于 3% |
| 可迁移结论 | 间接法（柱前衍生化）用常规反相柱即可实现对映体分离，适合氨基酸这类可定量衍生的化合物。衍生化效率与稳定性需纳入方法验证 |
延伸：直接法（手性固定相）与间接法的适用边界，见手性药物分离方案。