HPLC 色谱柱
ChiralONE® 手性色谱柱
ChiralONE® 手性色谱柱采用高纯硅胶为基质,适用于大多数手性化合物的分离。5 μm 粒径系列可用于常规分析,10 μm 粒径系列适合制备分离;性能完全等同于进口品牌手性色谱产品,优异的性价比可有效减少分析到制备的实验成本。产品覆盖多糖衍生物键合型/涂敷型与冠醚键合型固定相,广泛应用于手性药物 ee 值测定、氨基酸 D/L 拆分、胺类衍生物拆分等领域。
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ChiralONE 覆盖 USP 多糖类手性 L40 / L51 与冠醚 L66 / L127 等手性代号查看药典对照 →
产品介绍:① 采用高纯硅胶为基质,适用于大多数手性化合物的分离;② 5 μm 粒径系列可用于常规分析,10 μm 粒径系列适合制备分离;③ 性能完全等同于进口品牌手性色谱产品;④ 优异的性价比,减少分析到制备的实验成本。
手性色谱柱选择器
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① 分离对象
对映体高效拆分
高纯硅胶基质
5 μm 分析 · 10 μm 制备
键合型 · 涂敷型 · 冠醚型
性能等同进口 · 性价比优
产品参数 · 多糖类手性柱
基于纤维素/直链淀粉衍生物固定相,分为键合型(适用 pH 2–9)与涂敷型(适用 pH 2–7.5)两大系列:
| 名称 | 基质 | 粒径 | 手性官能团 | USP | 结合形式 | 适用 pH |
| Chiralone® A | 硅胶 | 5 / 10 μm | 直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯) | L99 | 键合型 | 2–9 |
| Chiralone® B | 硅胶 | 5 / 10 μm | 纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯) | — | 键合型 | 2–9 |
| Chiralone® C | 硅胶 | 5 / 10 μm | 纤维素-三(3,5-二氯苯基苯基氨基甲酸酯) | L119 | 键合型 | 2–9 |
| Chiralone® F | 硅胶 | 5 / 10 μm | 直链淀粉-三(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯) | L60 | 键合型 | 2–9 |
| Chiralone® M | 硅胶 | 5 / 10 μm | 纤维素-三(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯) | — | 键合型 | 2–9 |
| Chiralone® AM | 硅胶 | 5 / 10 μm | 直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯) | L51 | 涂敷型 | 2–7.5 |
| Chiralone® JM | 硅胶 | 5 / 10 μm | 纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯) | L80 | 涂敷型 | 2–7.5 |
| Chiralone® AZ | 硅胶 | 5 / 10 μm | 直链淀粉-三(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯) | — | 涂敷型 | 2–7.5 |
| Chiralone® OM | 硅胶 | 5 / 10 μm | 纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯) | L40 | 涂敷型 | 2–7.5 |
| Chiralone® ZM | 硅胶 | 5 / 10 μm | 纤维素-三(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯) | L123 | 涂敷型 | 2–7.5 |
特殊手性柱 · 冠醚型
Chiralone® 与 Chiralone®-ME(ME 为氨基甲基化官能团)在应用上是互补的产品。适用样品:α-氨基酸、α-氨基酸酯;伯/仲胺衍生物;β-氨基酸;芳基 α-氨基酮。
| 名称 | 粒径 | 手性官能团 | USP | 结合形式 | 适用 pH | 适用范围 |
| Chiralone®-R(+) | 5 μm | 冠醚-(+)-(18-冠-6)-酸(键合于 APS) | L66 | 键合型 | 1.5–7.5 | 氨基酸和胺类化合物 |
| Chiralone®-S(−) | 5 μm | 冠醚-(−)-(18-冠-6)-酸(键合于 APS) | L66 | 键合型 | 1.5–7.5 | 氨基酸和胺类化合物 |
| ChiralONE®-R(+) ME | 5 μm | 冠醚-(+)-(18-冠-6)-酸(键合于 N-甲基 APS),可正相和反相 | — | 键合型 | 1.5–7.5 | 胺类衍生物 |
| ChiralONE®-S(−) ME | 5 μm | 冠醚-(−)-(18-冠-6)-酸(键合于 N-甲基 APS),可正相和反相 | — | 键合型 | 1.5–7.5 | 胺类衍生物 |
溶剂兼容性
不同结合形式与分离模式下的溶剂适用性(○ 可以使用 ✕ 不可使用):
| 溶剂 | 键合型 | 涂敷型 |
|---|
| 正相 | 反相 | 正相 |
| 正己烷 | ○ * | — | ○ |
| 正庚烷 | ○ | — | ○ |
| 甲醇 | ○ * | ○ | ○ |
| 乙醇 | ○ | ○ | ○ |
| 异丙醇 | ○ | ○ | ○ |
| 乙腈 | ○ * | ○ | ○ |
| 四氢呋喃(THF) | ○ | ○ | ✕ |
| 甲基叔丁基醚 | ○ | — | ✕ |
| 甲苯 | ○ | — | ✕ |
| 三氯甲烷 | ○ | — | ✕ |
| 二氯甲烷 | ○ | — | ✕ |
| 乙酸乙酯 | ○ | — | ✕ |
| 水 | — | ○ | — |
| 缓冲盐 | — | ○ | — |
* 甲醇、乙腈和正己烷的相容性很低,所以不可以将它们混合使用。
洗脱能力:醇、四氢呋喃 >> 三氯甲烷 > 甲基叔丁基醚 >> 烷类。涂敷型可用溶剂(正相):n-Hexane、IPA、EtOH。
典型应用领域
手性药物 R/S 对映体纯度与 ee 值测定
氨基酸 D/L 对映体分析
胺类衍生物拆分
天然产物手性成分研究
手性中间体制备纯化
典型测试示例(Chiralone® 5A):色谱柱 Chiralone®-5A(4.6 mm I.D. × 250 mm),样品 (+)-R,R- / (+)-S,S-trans-Stilbene oxide,流动相 n-Hexane : Isopropanol = 90 : 10,流速 1 mL/min,压力 2.6 MPa,检测 UV 254 nm,柱温 30℃。
订购信息 · 多糖类
| 品名 | 规格 | 货号 |
| Chiralone® 5A | 4.6 mmI.D. × 250 mm | 00001-828 |
| Chiralone® 10A | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-830 |
| Chiralone® 10A | 20 mmI.D. × 250 mm | 00001-831 |
| Chiralone® 5B | 4.6 mmI.D. × 250 mm | 00001-677 |
| Chiralone® 5B | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-680 |
| Chiralone® 10B | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-835 |
| Chiralone® 5C | 4.6 mmI.D. × 250 mm | 00001-678 |
| Chiralone® 5C | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-681 |
| Chiralone® 5C | 20 mmI.D. × 150 mm | 00001-684 |
| Chiralone® 10C | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-760 |
| Chiralone® 10C | 20 mmI.D. × 250 mm | 00001-768 |
| Chiralone® 5AM | 4.6 mmI.D. × 250 mm | 00001-810 |
| Chiralone® 5AM | 10 mmI.D. × 150 mm | 00001-811 |
| Chiralone® 5AM | 20 mmI.D. × 250 mm | 00001-812 |
| Chiralone® 10AM | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-814 |
| Chiralone® 10AM | 20 mmI.D. × 250 mm | 00001-825 |
| Chiralone® 5JM | 4.6 mmI.D. × 250 mm | 00001-817 |
| Chiralone® 5JM | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-818 |
| Chiralone® 5JM | 20 mmI.D. × 250 mm | 00001-819 |
| Chiralone® 10JM | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-821 |
| Chiralone® 10JM | 20 mmI.D. × 250 mm | 00001-822 |
| Chiralone® 5F | 4.6 mmI.D. × 150 mm | 00001-1207 |
| Chiralone® 5F | 4.6 mmI.D. × 250 mm | 00001-1199 |
| Chiralone® 5F | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-1208 |
| Chiralone® 10F | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-1209 |
| Chiralone® 5M | 4.6 mmI.D. × 150 mm | 00001-1210 |
| Chiralone® 5M | 4.6 mmI.D. × 250 mm | 00001-1211 |
| Chiralone® 5M | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-1212 |
| Chiralone® 10M | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-1213 |
| Chiralone® 5AZ | 4.6 mmI.D. × 150 mm | 00001-1214 |
| Chiralone® 5AZ | 4.6 mmI.D. × 250 mm | 00001-1215 |
| Chiralone® 5AZ | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-1216 |
| Chiralone® 10AZ | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-1217 |
| Chiralone® 5OM | 4.6 mmI.D. × 150 mm | 00001-1218 |
| Chiralone® 5OM | 4.6 mmI.D. × 250 mm | 00001-1127 |
| Chiralone® 5OM | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-1219 |
| Chiralone® 10OM | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-1220 |
| Chiralone® 5ZM | 4.6 mmI.D. × 150 mm | 00001-1221 |
| Chiralone® 5ZM | 4.6 mmI.D. × 250 mm | 00001-1198 |
| Chiralone® 5ZM | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-1222 |
| Chiralone® 10ZM | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-1223 |
订购信息 · 冠醚型
| 品名 | 规格 | 货号 |
| Chiralone® -5R(+) | 4.6 mmI.D. × 150 mm | 00001-1224 |
| Chiralone® -5R(+) | 4.6 mmI.D. × 250 mm | 00001-1192 |
| Chiralone® -5R(+) | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-1225 |
| Chiralone® -5S(−) | 4.6 mmI.D. × 150 mm | 00001-1226 |
| Chiralone® -5S(−) | 4.6 mmI.D. × 250 mm | 00001-1227 |
| Chiralone® -5S(−) | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-1228 |
| Chiralone® -5R(+) ME | 4.6 mmI.D. × 150 mm | 00001-1229 |
| Chiralone® -5R(+) ME | 4.6 mmI.D. × 250 mm | 00001-1230 |
| Chiralone® -5R(+) ME | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-1231 |
| Chiralone® -5S(−) ME | 4.6 mmI.D. × 150 mm | 00001-1232 |
| Chiralone® -5S(−) ME | 4.6 mmI.D. × 250 mm | 00001-1233 |
| Chiralone® -5S(−) ME | 10 mmI.D. × 250 mm | 00001-1234 |
* 如需其他型号,请咨询。
使用说明 · 操作与维护
操作条件
| 流动相方向 | 色谱柱标签上的指示 |
| 压力限制 | 30 MPa(半制备柱 20 mm 内径柱压上限为 28 MPa) |
| 柱温 | 0–40 ℃ |
在 HPLC 的压力范围内操作,色谱柱填料稳定。给定柱温下,柱后压与流速呈线性关系;对于难分离的对映体,推荐使用长柱。① 最大流速要根据流动相黏度(流动相组成)而定,注意不要超过压力值上限(例如 300 Bar);② 柱后压是指由色谱柱本身引起的压力,其值为总压(液相体系 + 色谱柱)与液相体系(不接色谱柱时)压力之差;③ 半制备柱(20 mm 内径)柱压上限为 28 MPa。压力换算参考:1 MPa ≈ 10 bar,28 MPa ≈ 280 bar。
保养与维护
为延长柱子使用寿命,强烈建议使用保护柱。样品需用流动相来溶解,流动相和样品溶液需经 0.5 μm 滤膜过滤,以确保在使用前无任何沉淀。
清洗与再生(以下建议流速适用于内径 4.6 mm 分析柱)
色谱柱在不同溶剂中长时间使用后,手性分离能力可能会发生变化。为恢复之前的分离效果,可以通过再生消除因记忆效应(流动相、添加剂等)带来的手性分离变化。
| 适用型号 | 再生流程 |
| Chiralone® A 和 F | 用乙醇以 0.5 mL/min 冲洗 30 分钟,然后用 N,N-二甲基甲酰胺(DMF)以 0.3 mL/min 冲洗 3 小时;再用乙醇以 0.3 mL/min 冲洗 50 分钟。复测柱效前,先用运送色谱柱时的保存溶液以 0.5 mL/min 冲洗平衡 1 小时以上。 |
| Chiralone® B 和 C | 用乙酸乙酯以 1.0 mL/min 冲洗 30 分钟(流动相中加过添加剂的,冲洗 2 小时以上),色谱柱塞上堵头,室温下保存 48 小时以上。复测柱效前,先用运送色谱柱时的保存溶液以 0.5 mL/min 冲洗平衡 1 小时以上。 |
| Chiralone® M | 用甲基叔丁基醚以 1.0 mL/min 冲洗 60 分钟(流动相中加过添加剂的,冲洗 2 小时以上);再用乙醇以 0.5 mL/min 冲洗 50 分钟。复测柱效前,先用运送色谱柱时的保存溶液以 0.5 mL/min 冲洗平衡 1 小时以上。 |
色谱柱保存
色谱柱使用后,先用不含酸性或碱性添加剂的中性流动相冲洗,以除去添加剂,可用中性流动相来保存色谱柱。色谱柱在保存前或切换到 100% 有机溶剂前,必须先将盐除去(例如使用水 / 乙腈 60:40 v/v)。
反相模式方法开发
Chiralone® 多糖键合型手性柱也可以使用反相模式。从反相模式切换到正相模式,必须用互溶的溶剂充分冲洗置换,反之亦然;切换前建议先按再生流程对色谱柱进行再生,并用不含任何盐或缓冲溶液的流动相充分冲洗,确保无任何盐残留。
| 流动相(A:UV / MS 检测器) | 酸性(及两性)化合物 | 中性化合物 | 碱性化合物 |
| 水相 | 甲酸水溶液 pH 2.0 | 水 | 20 mM 碳酸氢铵水溶液 pH 9.0(碱性添加剂调节 pH 值) |
| 有机相 | 乙腈、甲醇、乙醇、异丙醇、四氢呋喃 |
| 常规起始条件 | 水相 60% / 乙腈 40% |
| 流动相(B:UV 检测器,缓冲液) | 酸性(及两性)化合物 | 中性化合物 | 碱性化合物 |
| 水相 | 50–100 mM 磷酸盐缓冲液 pH 2.0,或 pH 2.0 磷酸水溶液,或 100 mM 六氟磷酸钾(钠)水溶液 pH 2.0(磷酸调节 pH) | 水 | 20 mM 硼酸盐缓冲液 pH 9.0,或 20 mM 磷酸盐缓冲液 pH 8.0,或 100 mM 六氟磷酸钾(钠)水溶液 |
| 有机相 | 乙腈、甲醇、乙醇、异丙醇、四氢呋喃 |
| 常规起始条件 | 水相 60% / 乙腈 40% |
如果没有得到较好的分离效果,可尝试补充部分的流动相;所有缓冲盐溶液的浓度必须低于 500 mM。建议优先考虑乙腈,有机相洗脱能力顺序:乙腈 > 乙醇 > 甲醇(50% 乙腈 ≈ 65–70% 乙醇 ≈ 75–80% 甲醇);醇作为有机相柱压更高。保留时间可通过改变乙腈比例调节,降低柱温可增加保留时间和手性选择性。使用碱性条件时建议使用保护柱;禁止使用 pH 大于 9 的强碱性流动相,pH 大于 7 时建议在 5–25 ℃ 柱温下使用。
缓冲盐溶液配制(举例)
| 缓冲液 | 溶液 A | 溶液 B | 调节 |
| pH 2 磷酸盐 | 50 mM 磷酸二氢钾:3.40 g KH₂PO₄(FW 136.09),色谱级纯水溶解定容至 500 mL | 磷酸(H₃PO₄ 85% by weight) | 用 B 相调节 A 相至 pH 2.0 |
| pH 9 碳酸氢铵 | 20 mM 碳酸氢铵:0.79 g NH₄HCO₃(FW 79.06),色谱级纯水溶解定容至 500 mL | 碱性添加剂:二乙胺(DEA)、三乙胺(TEA)、氨水(NH₃)等(DEA 调 pH 峰形较好) | 用 B 相调节 A 相至 pH 9.0 |
| pH 9 硼酸盐 | 20 mM 四硼酸钠:3.81 g Na₂B₄O₇·10H₂O(FW 381.37),色谱级纯水溶解定容至 500 mL | 20 mM 硼酸:0.62 g H₃BO₃(FW 61.83),色谱级纯水溶解定容至 500 mL | 用 B 相调节 A 相至 pH 9.0 |
换算表
| 柱内径 (mm) | 2.1 | 3.0 | 4.6 | 10 | 20 | 30 |
| 流速 (mL/min) | 0.21 | 0.43 | 1.0 | 4.7 | 19 | 43 |
| MPa | bar | kg/cm² | psi |
| 1 | 10 | 10.197 | 145.038 |
| 0.1 | 1 | 1.020 | 14.504 |
| 9.807×10⁻² | 0.981 | 1 | 14.223 |
| 6.895×10⁻³ | 6.895×10⁻² | 7.031×10⁻² | 1 |
严格按照使用说明操作,可延长色谱柱使用寿命。如在手性柱使用中有任何疑问,请联系我们。
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